)Lm/gn(ンミブルア(A)位相差アルカリフォスファターゼ染色(B)結 果7006005004003002001000ホモ ARHホモ ARHホモ ARHヘテロ・ホモARH患者から樹立したiPS細胞由来肝細胞の機能評価 ヘテロ・ホモARH患者の末梢血単核球から作製したiPS細胞について、アルカリフォスファターゼ染色から未分化能を確認した（図2A）。肝細胞作製後、肝細胞分化の指標であるアルブミン産生能について確認した（図2B）。ホモARH患者由来iPS細胞から作製した肝細胞では、健康成人由来肝細胞に比較してLDLR蛋白質の発現量は有意に低下していたが、ヘテロARHとホモARH由来肝細胞における発現に差は認められなかった（図3A、C）、LDLRAP1蛋白質の発現量については、健康成人、ヘテロARH、ホモARHの順に低下した（図3A、D）。肝細胞からのPCSK9蛋白質の分泌については、ネガティブコントロールである培地中のPCSK9蛋白質量と同程度であったことから、分泌量は非遺伝性高コレステロール血症患者由来iPS細胞を用いた病態再現の試みヘテロ ARHヘテロ ARHヘテロ ARH図2 ヘテロ及びホモARH患者由来iPS細胞及び肝細胞の評価（A）各iPS細胞の位相差（10x）、アルカリフォスファターゼ染色像（4x）、（B）肝細胞のアルブミン産生量（平均値±SEM、n=6）常に少ないことが予想された（図3B）。各肝細胞におけるBODIPY-LDLの取り込みは、Lovastatin添加により増加した。また、ホモARH患者由来iPS細胞から作製した肝細胞におけるBODIPY-LDLの取り込みは、ヘテロARH患者由来肝細胞に比較して低下したが、Lovastatin処理時では両者に差は認められなかった（図4）。ヘテロ及びホモFH患者から樹立したiPS細胞由来肝細胞の機能評価 健康成人、ヘテロ及びホモFH患者の末梢血単核球から作製したiPS細胞について、アルカリフォスファターゼ染色及び未分化マーカー遺伝子（NANOG、OCT3/4、SOX2）の発現解析から未分化能を確認した（図5A、B）。肝細胞作製後、肝細胞分化の指標であるアルブミン産生能について確認した（図5C）。各肝細胞において、LDLR、PCSK9蛋白質の発現量に差は認められなかった（図6）。4747
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